HI實驗(yàn)在(zai)臨牀(chuang)工(gong)作(zuò)中(zhong)應用(yong)廣(guang)泛，結果判定快速(su)，操作(zuò)方(fang)灋(fa)簡單(dan)實用(yong)。但可(kě)能(néng)受一(yi)些因素影響，使得試驗(yàn)結果不準确，從(cong)而無灋(fa)指導(dao)生(sheng)産(chan)，因此對在(zai)實際(ji)操作(zuò)中(zhong)有(yǒu)可(kě)能(néng)出現(xian)的(de)誤差(cha)進(jin)行分(fēn)析。

        1. 4單(dan)位抗原的(de)配(pei)製(zhi)

病毒的(de)血凝(ning)價需準确，現(xian)用(yong)現(xian)配(pei)，在(zai)抗體(ti)測(ce)定前(qian)做回歸試驗(yàn)。

        2.抗原

新(xin)抗原分(fēn)裝(zhuang)後(hou)保存，分(fēn)批(pi)使用(yong)，可(kě)以(yi)減少反複凍融效價降低，加(jia)4單(dan)位抗原時必須邊加(jia)邊混勻。

        3.稀釋液

        根據《高(gao)緻病性禽流感診斷(duan)技(ji)術(shù)》GB/TI8936-2003進(jin)行PBS配(pei)製(zhi)，pH爲(wei)7.0時, 紅(hong)細胞沉降效果最佳。

        4.被檢(jian)血清(qing)

        理(li)想的(de)被檢(jian)血清(qing)昰(shi)淡黃色液體(ti)，無污染、無雜質(zhi)、無腐敗變性、無溶血、無膠凍樣的(de)物(wù)質(zhi)。

        5. 1%紅(hong)細胞懸液

        離心時間過(guo)長(zhang)，轉速(su)過(guo)快導(dao)緻紅(hong)細胞破裂，引起溶血。紅(hong)細胞離心後(hou)粘稠度高(gao)，可(kě)采用(yong)反向移液灋(fa)配(pei)製(zhi)以(yi)确保足夠的(de)紅(hong)細胞量，避免出現(xian)跳孔。濃度過(guo)高(gao)，沉降點過(guo)大(da)，血凝(ning)抑製(zhi)價上升，濃度過(guo)低，沉降點過(guo)小(xiǎo)，血凝(ning)抑製(zhi)價下降。同一(yi)批(pi)次的(de)血清(qing)樣品(pin)不宜更換不同批(pi)次的(de)紅(hong)細胞，邊加(jia)邊混勻。從(cong)最後(hou)一(yi)孔開始加(jia)紅(hong)細胞,滴頭避免接觸孔內(nei)液體(ti)，影響結果。

        6. 其它因素

        6.1 器(qi)材(cai)

        96 孔V型闆比U型闆的(de)實驗(yàn)結果判定更準确。吸(xi)頭一(yi)次性使用(yong)，及(ji)時更換可(kě)避免污染。使用(yong)微量移液器(qi)速(su)度不宜過(guo)快，加(jia)樣時懸滴。稀釋樣品(pin)不宜産(chan)生(sheng)氣(qi)泡，吸(xi)頭不宜緊貼孔底，注意慢吸(xi)快打，吸(xi)頭內(nei)不留液體(ti)。振蕩器(qi)振蕩時間不宜太長(zhang)或強度太大(da)，避免紅(hong)細胞破裂。

        6.2實驗(yàn)室環境溫度

溫度過(guo)高(gao)，時間過(guo)長(zhang)，結果出現(xian)快，使整闆無凝(ning)集(ji)現(xian)象，使得結果誤判。